冷胁迫是引响农农物产品的生产数量的重要的坏境挑戰之三。钙根据性蛋白酶激酶（CDPKs/CPKs）可将钙（Ca²⁺）手机信号表达到组织细胞并提高对挫折反应的重要的调接分子，但其宏观调控机制化尚不看不清楚。

2025年4月，浙江大学周艳虹教授团队在New Phytologist杂志上发表题为“CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato”的研究论文，揭示了CPK27通过磷酸化HY5促进类黄酮生物合成，从而将冷触发的Ca²⁺信号与类黄酮途径相结合，以增强番茄冷耐受性的分子机制。本文为理解冷信号转导提供了重要策略，拜谱生物为该研究提供了磷硝化作用突显位点加测服务。

国外英文标题格式：CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato（New Phytologist IF：8.3）

常常子标题：CPK27通过磷酸化HY5促进黄酮类化合物的生物合成来增强番茄的耐寒性

企业企业单位：浙江大学

探析建材：番茄

拜谱具备的技术：磷硝化作用装饰位点检测工具

设计想法：

一、科学研究结果显示

1、CPK27在温度过低胁迫下表现上涨，关键在于加强主茎抗冻性

以往钻研反映出，CPK27在冷胁迫要求下表现上浮。为验正该成果，本段中诗人操作CPK27的几个敲除甲基化系（cpk27 #2，#6）实施抗冻性测试图片，显示CPK27的转录质量可观过于参考组（图1a-b）。在CPK27表现被阻止的仿真植物中，对抗冻性的资料用处可观衰弱。进那步的亚癌细胞膜确定与系统激活钻研反映出，冷胁迫利于CPK27向癌细胞膜核1个，并资料其磷过酸质量（图1 f）。免疫力印记了解进那步可确认冷胁迫帮助 CPK27 在核内蛋白酶丰度增高、胞内丰度增多，外源CaCl₂治疗可部门还原cpk27的冷皮肤敏感表型，反映出CPK27根据Ca²⁺预警引领用处。（图1g-k）

图1 CPK27以Ca²⁺信任方法提升番茄抗冻性

2、CPK27能够 控制黄吩噻嗪炼制方法减缓低温制冷的效果伤到

转录组测序结局提升，CPK27的过描述有效上浮黄胺类生态学镶嵌重要性DNA，如CHS、CHI和FLS等，一并黄胺类分泌环路有效聚集。而CPK27突变性体中他们DNA描述变动，提升CPK27依据增强黄胺类镶嵌可以帮助根系舒缓底温胁迫获得的氧化的压强（图2a-e）。

图2 RNA-seq浅析CPK27改善的冷反应DNA

3、HY5是CPK27介导的抗寒数字信号信号通路中的关键性靶标

为安全验证 CPK27 与 HY5 的主动影响，诗人第步骤做好了酵母菌双混种杂交（Y2H）實驗操作，結果否认二者存有主动影响（图3a）。双碳原子荧光相容（BiFC）實驗操作进步骤是因为CPK27 与 HY5 在细胞系核内引发主动影响（图 3b）。后来用免疫性共积淀等技術，得知HY5与CPK27在观赏植物里面存有主动影响，且二者的主动影响具有着钙阴阳离子（Ca²⁺）依赖症性（图 3c）。显然，在Co-IP實驗操作的蛋白酶分离出前产生冷胁迫治疗，結果提示冷胁迫可增加HY5与CPK27的主动影响（图 3d）。

图3 CPK27与HY5互作并磷过酸其要素位点

4、CPK27磷酸性反应HY5改善其转录几丁质酶，增强黄大环内酯什么是基因传达

免疫印迹分析结果发现，冷胁迫处理后CPK27可提高HY5蛋白的磷酸化水平，在体外直接磷酸化 HY5（图 4a-c）。通过磷过酸呈现位点的检测，发现HY5蛋白的S23和S57两个潜在磷酸化位点。为验证这些位点的功能，作者通过构建非磷酸化突变体，进行磷酸化水平验证，其中双突变体的磷酸化水平下降更为明显（图 4d）。这些结果表明，CPK27 介导的 HY5 磷酸化依赖于 S23 和 S57 这两个特定位点。

图4 CPK27磷硝化作用HY5并怎强其安稳性

5、CPK27 在类黄酮生物制品合出环路中用途于HY5的上下游

总合DNA体现和分泌物讲解成果（图5），CPK27在冷胁迫死机工作中帮助于HY5的长江上游，完成改善 HY5 介导的类黄酮菌物炼制信号通路影响力动植物耐冷性。

图5 CPK27的功效于HY5上中下游

二、文章标题总结

上述讲到提出的，选文深入分析表面CPK27磷碱化呈现HY5淀粉酶，促活类黄酮转化成方式，迫使抗空气氧化物资积聚，继而提升抗冻学习能力。该深入分析系统阐述了“Ca²⁺-CPK27-HY5-类黄酮”级联调节作用管理机制（图6），证明CPK27介导的HY5磷碱化是接触钙卫星信号与次生新陈代谢攻击的重要性基本原则，为认知树种面对困境响应的网络上可以提供了新第一人称。

图6 CPK27-HY5功能加快花草耐受性冷胁迫的制度

三、拜谱工作小结

本研究利用转录组和磷酸化修饰位点检测等技术，揭示了CPK27通过磷酸化 HY5调控类黄酮生物合成途径，从而在寒冷环境下增强番茄耐寒性的机制，对解析植物应对寒冷的复杂分子调控网络具有重要意义。拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的血清酶质组学、遮盖血清酶质组学、分解代谢组学、转录组学等几组学货品技术服务，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。欢迎咨询！

基准资料：Lin R, Zhang W, Tian R, et al. CPK27 enhances cold tolerance by promoting flavonoid biosynthesis through phosphorylating HY5 in tomato. New Phytol. 2025;246(5):2174-2191. doi:10.1111/nph.70134